北京体视荧光显微镜2018报价

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在荧光显微镜的基本原理是细胞成分有荧光剂的帮助的非常具体的可视化。这可以是荧光蛋白 - 例如绿色荧光蛋白 - 基因与感兴趣的蛋白质。如果克隆是不可能的 - 例如组织学标本中 - 这是需要使用其他技术，如免疫荧光染色来可视化目的蛋白质。用于此目的的抗体的利用，这是可以直接或间接地连接到不同的荧光染料和结合到适当的目标结构。此外，与荧光染料的徕卡显微镜的帮助下，不仅限于蛋白，但它也提供了机会染色核酸，多糖和其他结构。可以检测甚至非生物物质，如钙离子。本文介绍了常用的荧光剂。

荧光免疫

在荧光显微镜有两种方式来可视化你的目标蛋白。无论是与一个固有荧光信号的帮助下 - 这意味着通过克隆，因此基因连接的荧光蛋白与靶蛋白。或借助荧光标记的特异性结合到感兴趣的蛋白质的抗体。对于一些生物的问题是比较有用的，甚至需要进行后者。在组织学样品的情况下，例如，它不可能使用的，因为在一般的样品被从其中不持有任何荧光蛋白的生物来源的荧光蛋白。此外，如果一个有效的抗体可用，免疫比荧光蛋白技术快得多，是你要克隆的兴趣和转染的DNA的基因插入到适当的细胞。荧光蛋白的另一个缺点在于身为蛋白质本身的性质。有了它，它们具有可导致功能障碍或误解关于感兴趣的附着蛋白的细胞内特定蛋白质性的特点。然而，应当认为，使用荧光蛋白是通常选择的方法来观察活细胞。 

免疫荧光法利用抗体与其抗原的非常特异性结合亲和力的。这可以有两种不同的外观。最简单的方法是使用一种被结合到感兴趣的蛋白的荧光标记的抗体。这就是所谓的直接免疫荧光。 

在大多数情况下，有两种形式的抗体的使用。第一个结合靶蛋白并没有荧光标记本身（第一抗体）。但是，第二个（第二抗体），其结合第一抗体特异性带有荧光染料。这种方法被称为间接免疫荧光和具有若干优点。一方面有一个放大的效果，因为多于一个的第二抗体结合于一个第一抗体。另一方面，没有必要所有的时间标记每个抗体对您喜欢的蛋白与荧光染料而使用的商业荧光标记的第二抗体。广泛使用的荧光染料的免疫是FITC，TRITC或都提到了以下几个Alexa的Fluor?染料。

FITC 和TRITC

异硫氰酸荧光素（FITC）是有机荧光染料仍然在免疫荧光和流式细胞术使用。它的激发/发射峰在517分之495nm和可耦合到不同的抗体，其反应性异硫氰酸酯基，其上结合的蛋白质的氨基，巯基，咪唑基，酪氨酰基或羰基的帮助。它的基本形式 - 荧光素 - 具有332克/摩尔的摩尔质量，并经常被用来作为荧光示踪剂。 FITC（388克/摩尔），这是用于荧光显微镜和服务为原点进行进一步的荧光染料类的AlexaFluor?488第一的染料之一。其荧光活性是由于其大的共轭芳族电子系统，它是由光的蓝色光谱激发。